台式BOD五日生化测定仪通过监测水样中微生物分解有机物消耗的溶解氧，计算五日生化需氧量（BOD₅），是评估水体有机污染程度的重要设备。正确使用需围绕 “样品适配、试剂精准、培养规范” 原则，按全流程操作要求执行，避免因操作不当导致数据偏差。

一、检测前准备：保障基础条件合规

检测前需确认仪器与环境状态：将仪器放置在温度稳定（20±1℃）、无强光直射、无剧烈震动的实验室区域，避免靠近热源或通风口，防止培养过程中温度波动影响微生物活性；接通电源，开启仪器预热 30 分钟，检查显示屏、搅拌装置、温度控制系统是否正常，确保培养箱内温度稳定在 20℃，若温度偏差超过 ±0.5℃，需调整温控参数直至达标。

试剂与器具准备需满足纯度与洁净要求：准备经标定的稀释水（用无有机物污染的蒸馏水或去离子水配制，加入磷酸盐缓冲液、硫酸镁、氯化钙、氯化铁溶液调节 pH 至 7.2，溶解氧需饱和，通常曝气 1-2 小时后静置）、接种液（根据水样类型选择适配菌种，如生活污水上清液、土壤浸出液，确保菌种活性）、专用 BOD 培养瓶（容积通常为 250mL，需提前用稀释水润洗 2-3 次，避免残留有机物污染）、移液管、容量瓶等器具，所有器具需经高温灭菌或用稀释水浸泡处理，防止微生物污染影响检测结果。

二、样品预处理：消除干扰与适配检测

样品预处理需根据水样特性调整：若水样 pH 值不在 6-8 范围，需用稀盐酸或稀氢氧化钠溶液逐滴调节，边加边搅拌，避免局部酸碱浓度过高杀灭微生物；若水样含悬浮物，需用 0.45μm 微孔滤膜过滤，去除颗粒杂质（过滤前滤膜需用稀释水润洗），防止悬浮物吸附有机物或阻碍氧气传递；若水样含毒性物质（如重金属、强氧化剂），需先进行稀释（用稀释水按比例稀释至毒性阈值以下）或加入中和剂（如硫化物水样加入乙酸锌溶液沉淀），避免毒性物质抑制微生物活性。

水样稀释需按有机物浓度确定倍数：根据水样预估 BOD₅值选择稀释倍数（如预期值 50-100mg/L 时稀释 5-10 倍），稀释时用移液管精准量取水样与稀释水，在容量瓶中混合均匀，确保稀释后水样 BOD₅值落在仪器检测范围（通常 2-600mg/L），避免浓度过高导致溶解氧耗尽或过低导致误差偏大。稀释后的水样需立即检测，若暂不检测，需密封后置于 2-5℃冷藏，储存时间不超过 24 小时，检测前恢复至 20℃。

三、试剂添加与装置搭建：规范操作细节

试剂添加需严格按比例执行：向洁净的 BOD 培养瓶中加入稀释后的水样（或空白稀释水，用于空白对照）至瓶容积的 2/3，加入适量接种液（通常每升水样加入 10-20mL，具体用量按接种液浓度调整），再补加稀释水至瓶口，确保瓶内无气泡（若有气泡，用滴管吸除），避免气泡影响溶解氧测定。若使用密封式培养装置，需加入专用密封液（如石蜡油）覆盖液面，隔绝空气；若使用压差式装置，需连接溶解氧检测探头，确保探头与水样充分接触，无气泡附着。

装置搭建需确保密封性与稳定性：将培养瓶放入仪器培养箱，按编号对应放置，连接检测线路（如压差传感器、温度传感器），检查接口是否牢固，避免松动导致数据传输中断；空白对照瓶需与样品瓶同步放置，确保培养条件一致，用于扣除空白值对结果的影响。启动仪器搅拌功能，调节搅拌速率（通常 50-100r/min），确保水样混合均匀，溶解氧分布一致，避免搅拌过快导致气泡产生或过慢导致溶解氧分层。

四、五日培养：严格控制培养条件

五日培养过程需维持稳定环境：培养期间严禁开启培养箱门，避免温度波动与外界污染，若仪器提示温度异常，需先记录异常时间与温度偏差，待培养结束后评估对结果的影响；定期查看仪器运行状态，包括搅拌是否正常、数据记录是否连续，若出现故障报警，需立即停机排查，故障排除后若培养时间未超过 24 小时，可重新启动培养，超过则需重新取样检测。

培养期间需避免外界干扰：实验室需保持安静，避免剧烈震动影响仪器传感器精度；禁止在培养箱附近使用强电磁设备，防止干扰数据采集；若水样易挥发，需检查培养瓶密封性，防止有机物挥发导致结果偏低。

五、结果计算与设备清理：保障数据与设备维护

培养结束后需准确计算结果：仪器自动记录培养前后水样的溶解氧差值，结合稀释倍数与接种液空白值，按公式计算 BOD₅值（BOD₅=(培养前溶解氧 - 培养后溶解氧)× 稀释倍数 - 接种液空白值）；若平行样检测结果相对偏差超过 ±10%，需重新取样检测，排查是否因稀释不均、菌种活性不足导致偏差。

设备清理需彻底且及时：取出培养瓶，用稀释水冲洗 3-5 次，若瓶内有残留有机物，可用中性洗涤剂浸泡后清洗，晾干后收纳；检测探头需用稀释水冲洗干净，浸泡在专用保护液中（如饱和氯化钾溶液），避免干燥损坏；关闭仪器电源，清理操作台面上的试剂残留与废液，废液需分类收集（如含菌废液需高温灭菌后排放），剩余试剂密封后按要求储存，确保下次使用时活性与纯度达标。

通过严格执行上述操作步骤，可确保台式BOD五日生化测定仪的检测过程规范、数据准确，为水体有机污染评估提供可靠依据，同时延长仪器使用寿命，保障长期稳定运行。