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BOD5的测定是一个生物化学耗氧过程，水样中的微生物以水中有机物为营养生长繁殖的同时，分解有机物并消耗了水中的溶解氧，因此水样中必须含有一定数量的对其中有机物有降解能力的微生物。 工业废水中一般都含有数量不等的有毒物质，这些有毒物质会对微生物的活动产生抑制作用，因此工业废水中自有微生物的数量很少甚至根本没有。如果采用测定微生物含量丰富的城市污水的普通方法，可能就检测不到废水中真正有机物的含量，至少是偏低。比如经高温和灭菌处理及pH过高或过低的水样，除了需要采取进行降温、还原杀菌剂或调整pH值等预处理措施外，为保证测定BOD5时的准确性，也必须进行有效接种。 测定工业废水的BOD5时，如果毒性物质含量太大，有时还要用药剂予以去除；如果废水呈酸性或碱性，还要先进行中和处理；而且通常水样要经过稀释，然后才能采用标准稀释法测定。向水样中水加入适量含经过驯化的好氧微生物的接种液（如处理这种工业废水的曝气池混合液），就是为了使水样中含有一定数量的对有机物具有降解能力的微生物。在满足其他测定BOD5的条件下，利用这些微生物分解工业废水中的有机物，测定水样培养5d的耗氧量，即可得到工业废水的BOD5值。 污水处理场的曝气池混合液或二沉池出水是测定进入污水处理厂的废水BOD5时的理想的微生物种源。直接用生活污水接种，因其中溶解氧很少甚至没有，容易出现厌氧微生物，需要长时间培养驯化，因此，这种经过驯化的接种液仅适用于作为特定需要的某些工业废水。
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